POPIS
Metody separace na bázi kuliček a sloupců silně závisí na rychlosti a snadnosti afinitních vazebných systémů. Ligandy, jako je streptavidin, protilátky a
lektiny, se používají jak k zachycení specificky označených cílů, tak k izolaci buněk a biomolekul, které přirozeně exprimují partnera vázajícího ligand.
Jedinečné vlastnosti rostlinných lektinů, které váží sacharidy, jako je Concanavalin A (Con A), je činí užitečnými pro značení a izolaci buněk prezentujících glykan a glykoproteinů v séru a buněčném lyzátu. Lektiny byly navíc použity ve studiích buněčné adheze k ovlivnění aktivace lymfocytů a
prozkoumání terapeutik na bázi sacharidů.
Naše mikročástice BioMag Plus potažené Con A poskytují pohodlný způsob izolace glykoproteinů a
polysacharidů obsahujících manosylové a glukosylové látky ze séra nebo buněčného lyzátu nebo pro zkoumání dalších procesů zprostředkovaných lektinem / glykanem. BioMag Concanavalin A byl také použit pro
CUT & RUN, protokol profilování chromatinu, který má oproti ChIP několik klíčových výhod. (viz reference)
CHARAKTERISTIKA
Concanavalin A (Con A) je kovalentně připojen k funkcionalizovaným
částicím BioMag®Plus pro použití v glykoproteinových izolacích ze séra a buněčných extraktů.
Con A je 104 000 Da protein složený ze čtyř identických podjednotek a existuje
jako aktivní dimer nebo tetramer v závislosti na pH. Jeho sacharidová vazba
partnery jsou a-D-glukóza a a-D-mannóza s nemodifikovanými OH skupinami na
C-3, C-4 a C-6 a koncovými glukózovými zbytky proteinů a peptidů.
Con A aglutinuje červené krvinky (RBC), interaguje s imunoglobulinovými
glykopeptidy a je mitogenem lymfocytů. Váže na sebe některé bakterie.
Vazba Con A je zprostředkována ionty kovů, jejichž stabilizací je konformace. Každé
vazebné místo vyžaduje ionty vápníku a manganu a použití pufrů s EDTA
nebo jinými chelátory kovů povede ke ztrátě schopnosti vazby sacharidů.
Střední průměr: ~ 1,0 um
koncentrace: 5 mg / ml
Con navázaným: Stanoveno A280
MATERIÁLU
materiál poskytovaný
3 ml nebo 10 ml částic potažených Con A v 10 mM PBS s 0,1% azidem sodným
Potřebný materiál
1,5 ml nebo 2 ml mikrocentrifugační zkumavky
Savčí sérum: 0,4 ml ředění 1:20 v PBS / testovací
vazebný pufr: 1x PBS + 0,1% NaN3
+ 1 mM MgCl2
+ 1 mM MnCl2
+ 1 mM CaCl2
(pH 7,4)
promývací pufr: 1x PBS + 0,1% NaN3
+ 1 mM MgCl2
+ 1 mM MnCl2
+ 1 mM CaCl2
(pH 7,4) + 0,1% Tween® 20
Con A eluční pufr: 5 mM Tris (pH 8,0) ) + 0,15 M NaCl + 0,05% SDS + 1 M Glukóza
Přesné pipety s jednorázovými špičkami pro dodání 20-200 µL, 200-1000 µL
Mikrocentrifugační oddělovač zkumavek: 1,5 ml magnetický oddělovač (katalogový kód LS001) Mikrocentrifugační oddělovač zkumavek BioMag Multi-6 (katalogový kód MS002) Vortexový
mixér a trubkový rotátor.

 

BioMag Plus

BioMag Plus

POSTUP
Výzkumníkům se doporučuje optimalizovat použití částic v jakékoli aplikaci.
1. Připravte 0,4 ml vzorku séra zředěním 1:20 10 mM PBS.
2. Přeneste 1 ml částic BioMag®Plus Con A do čisté mikrocentrifugační zkumavky. Umístěte zkumavku na magnet, aby se částice oddělily od roztoku.
Opatrně odstraňte a zlikvidujte roztok.
3. Částice promyjte přidáním 1 ml vazebného pufru. Dobře promíchejte.
4. Promývání částic opakujte ještě jednou. Po posledním promytí odstraňte supernatant.

5. Přidejte 0,1 ml vazebného pufru ke vzorku séra z kroku 1. Přidejte vzorek k částicím a dobře promíchejte inverzí nebo vortexem, abyste částice resuspendovali.
6. Umístěte vzorek na trubkový rotátor a míchejte 10-30 minut při pokojové teplotě.
7. Vyjměte vzorek z rotátoru a vložte jej do magnetického separátoru. Vyčištěný supernatant opatrně vyjměte.
8. Částice promyjte přidáním 0,5 ml promývacího pufru. Dobře promíchejte převrácením nebo vortexovým mícháním.
9. Opakujte kroky 7-8. Resuspendujte částice 0,5 ml promývacího pufru a umístěte na zkumavku na 5 minut.
10. Opakujte kroky 7-9.
11. Vyměňte zkumavku s částicemi na magnetickém separátoru a opatrně odstraňte / zlikvidujte supernatant.
12. K částicím přidejte 250 µL elučního pufru. Zkumavku promíchejte, aby se částice resuspendovaly, a zkumavku umístěte na rotátor na 10-30 minut při pokojové teplotě.
13. Vyměňte zkumavku částic na magnetickém separátoru a opatrně odstraňte eluát a přeneste ji do čisté zkumavky s mikrocentrifugou pro pozdější použití nebo skladování.
14. Opakujte kroky 12-13. Eluáty mohou být shromážděny a vysráženy. Eluáty skladujte na ledu k okamžitému použití nebo zmrazte pro dlouhodobé skladování.
POZNÁMKY
• Vyhněte se použití činidel s EDTA nebo jinými kovovými chelátory, protože to sníží účinnost vazebného pufru.
• Inhibitory proteázy lze použít, pokud jsou izolovány citlivé glykoproteiny.
• Obnova nízkého glykoproteinu může být spojena buď zvýšením doby inkubace eluce na více než 10 minut, a / nebo vařením částic ve 200 µL
vzorkového pufru SDS-PAGE po dobu 5 minut a poté magnetickým oddělením částic z eluátu. (Poznámka: Vařením se mohou oddělit některé lektiny a mohou se
také uvolnit nespecificky vázané proteiny.)
• Vzorky eluátu spusťte na elektroforetickém gelu SDS-PAGE 4-20% Tris-Glycine a obarvěte pásy glykoproteinů pomocí sady GlycoGel Stain Kit
(katalogový kód Polysciences) 24693) k vizualizaci.
• Po barvení GlycoGel obarvěte gel pomocí Coomassie G250 (1 ml nebo 2 ml 0,5% Coomassie G250 v 50% methanolu a 10% kyselině octové) pro vizualizaci
dalších proteinových pásů.
• Odstranění albuminu a IgG ze vzorků séra může zlepšit izolaci glykoproteinů s nízkou koncentrací. Pokud je to žádoucí, použijte soupravu pro
odstranění albuminu BioMag® ProMax (katalogový kód BP658) a / nebo soupravu na odstranění IgG séra BioMag® ProMax (katalogový kód BP659).

 

Katalogové číslo Popis Koncentrace (mg/ml) Objem (ml) Produktový list Bezpečnostní list
BM551 BioMag Streptavidin 5 5, 50 PDS 551.pdf Bezpečnostní list MB232.pdf
BP628  Streptavidin BioMag Plus 5 10 PDS 621.pdf Bezpečnostní list MB232.pdf
BM568 BioMag Streptavidin bez nukleázy 1 10, 25 PDS 530.pdf Bezpečnostní list MB232.pdf
BP621 Souprava pro vázání  streptavidinu/biotinu BioMag Plus 5 5 PDS 621.pdf SDS MB232.pdf
SDS MB255 Prací/spojovací pufr.pdf

 

 

Concanavalin A (ConA)

05-0106-1000 1 g
EUR 199

Concanavalin A (ConA)

05-0106-10000 10 g Ask for price

Concanavalin A (ConA)

05-0106-100000 100 g Ask for price

Concanavalin A (ConA)

05-0106-250 250 mg
EUR 88

Concanavalin A IV

abx082153-25mg 25 mg
EUR 258
  • Shipped within 5-10 working days.

BioMagPlus Concanavalin A

BP531-10 10 ml
EUR 1166.44
Description: BioMagPlus Concanavalin A is magnetic particles with affinity binding proteins may be coated with the primary antibody or biotinylated molecule

BioMagPlus Concanavalin A

BP531-3 3 ml
EUR 518.29
Description: BioMagPlus Concanavalin A is magnetic particles with affinity binding proteins may be coated with the primary antibody or biotinylated molecule

Concanavalin A (Con A) Antibody

20-abx101152
  • EUR 272.00
  • EUR 133.00
  • EUR 676.00
  • EUR 342.00
  • EUR 244.00
  • 100 ug
  • 10 ug
  • 1 mg
  • 200 ug
  • 50 ug
  • Shipped within 5-7 working days.

Concanavalin A, CF350 conjugate

29015 5x1mg
EUR 209
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF488A conjugate

29016 5x1mg
EUR 209
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF594 conjugate

29017 5x1mg
EUR 209
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF633 conjugate

29018 5x1mg
EUR 209
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF640R conjugate

29019 5x1mg
EUR 209
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF680 conjugate

29020 5x1mg
EUR 240
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF770 conjugate

29058 5x1mg
EUR 240
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF405M conjugate

29074 5x1mg
EUR 219
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF405S conjugate

29075 5x1mg
EUR 219
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A, CF750 conjugate

29080 5x1mg
EUR 240
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 5x1mg

Concanavalin A ELISA Kit

20-abx052181
  • EUR 6439.00
  • EUR 3432.00
  • EUR 801.00
  • 10 × 96 tests
  • 5 × 96 tests
  • 96 tests
  • Shipped within 5-7 working days.

Human Concanavalin A ELISA kit

E01C0795-192T 192 tests
EUR 1270
  • Kit contents: 1. MICROTITER PLATE * 1 2. ENZYME CONJUGATE*1 vial 3. STANDARD A*1 vial 4. STANDARD B*1 vial 5. STANDARD C*1 vial 6. STANDARD D*1 vial 7. STANDARD E*1 vial 8. STANDARD F*1 vial 9. SUBSTRATE A*1 vial 10. SUBSTRATE B*1 vial 11. STOP SOLUT
  • Show more
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Human Concanavalin A in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.

Human Concanavalin A ELISA kit

E01C0795-48 1 plate of 48 wells
EUR 520
  • Kit contents: 1. MICROTITER PLATE * 1 2. ENZYME CONJUGATE*1 vial 3. STANDARD A*1 vial 4. STANDARD B*1 vial 5. STANDARD C*1 vial 6. STANDARD D*1 vial 7. STANDARD E*1 vial 8. STANDARD F*1 vial 9. SUBSTRATE A*1 vial 10. SUBSTRATE B*1 vial 11. STOP SOLUT
  • Show more
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Human Concanavalin A in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.

Human Concanavalin A ELISA kit

E01C0795-96 1 plate of 96 wells
EUR 685
  • Kit contents: 1. MICROTITER PLATE * 1 2. ENZYME CONJUGATE*1 vial 3. STANDARD A*1 vial 4. STANDARD B*1 vial 5. STANDARD C*1 vial 6. STANDARD D*1 vial 7. STANDARD E*1 vial 8. STANDARD F*1 vial 9. SUBSTRATE A*1 vial 10. SUBSTRATE B*1 vial 11. STOP SOLUT
  • Show more
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Human Concanavalin A in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.

Goat Concanavalin A ELISA kit

E06C0795-192T 192 tests
EUR 1270
  • Kit contents: 1. MICROTITER PLATE * 1 2. ENZYME CONJUGATE*1 vial 3. STANDARD A*1 vial 4. STANDARD B*1 vial 5. STANDARD C*1 vial 6. STANDARD D*1 vial 7. STANDARD E*1 vial 8. STANDARD F*1 vial 9. SUBSTRATE A*1 vial 10. SUBSTRATE B*1 vial 11. STOP SOLUT
  • Show more
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Goat Concanavalin A in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.

Goat Concanavalin A ELISA kit

E06C0795-48 1 plate of 48 wells
EUR 520
  • Kit contents: 1. MICROTITER PLATE * 1 2. ENZYME CONJUGATE*1 vial 3. STANDARD A*1 vial 4. STANDARD B*1 vial 5. STANDARD C*1 vial 6. STANDARD D*1 vial 7. STANDARD E*1 vial 8. STANDARD F*1 vial 9. SUBSTRATE A*1 vial 10. SUBSTRATE B*1 vial 11. STOP SOLUT
  • Show more
Description: A competitive ELISA for quantitative measurement of Goat Concanavalin A in samples from blood, plasma, serum, cell culture supernatant and other biological fluids. This is a high quality ELISA kit developped for optimal performance with samples from the particular species.