Název: Stripping Solution pro protilátky
Katalogové číslo: L7710A, 500ml * GV0480, 500ml 5X
* Dostatek reagencií pro membránové proužky 3000 cm2 nebo 200-400 nebo 20-40 standardních blotů
• Skladování: Skladujte při pokojové teplotě (pro dlouhé skladování: +4 ° C) (L)
● Merkaptoethanol bez štiplavého zápachu Šetří čas
● Odizolování protilátek se provádí při pokojové teplotě. Není nutné zahřívání blotů Šetří nákladný vzorek
● Odizolujte protilátky za pouhých 15 minut při pokojové teplotě Ekonomické
● Ve většině případů se lze vyhnout opětovnému blokování blotů
Vyrovnávací vyrovnávací paměť Western Blot
Western BLoT Stripping Buffer je řešení pro odstranění primárních a sekundárních protilátek ze sondovaných membrán Western blot. Odstranění protilátky tímto pufrem může probíhat za mírných podmínek (pokojová teplota, 30minutová inkubace), čímž se minimalizují ztráty imobilizovaného proteinu z membrány. Při použití membrány PVDF lze stejnou membránu odizolovat a znovu probudit 2–5krát. Po stripování lze membrány znovu sondovat, a to buď s jinou koncentrací primární protilátky, nebo se zcela odlišnou primární protilátkou.
Kočka. # | Produkt | Velikost | Licence | Množství | Podrobnosti | |
---|---|---|---|---|---|---|
T7135A | Oddělovací vyrovnávací paměť Western BLoT | 500 ml | * | |||
Western BLoT Stripping Buffer je činidlo, které dokáže odstranit primární a sekundární protilátky z membrán Western blot. Po ošetření stahovacím pufrem lze membránu znovu použít; je možné sondu membrány buď s jinou koncentrací primární protilátky, nebo se zcela odlišnou primární protilátkou. U tohoto produktu probíhá reakce odstraňování protilátek za relativně mírných podmínek (pokojová teplota, 30 minut), a proto dochází k velmi malé ztrátě imobilizovaného proteinu z membrány. Při použití membrány PVDF lze stejnou membránu odizolovat a znovu sondovat 2–5krát. |
Blokovací vyrovnávací paměť | Blokovací činidlo | Přednosti | Kdy použít | Dostupné formáty |
---|---|---|---|---|
StartingBlock |
Jediný purifikovaný protein bez séra a biotinu |
|
|
PBS TBS PBST TBST |
Blocker FL |
Jediný purifikovaný protein |
|
|
10x |
Pierce Clear Milk Blocking Buffer |
Vyčeřené a stabilizované mléčné bílkoviny |
|
|
Borát, pH 7,6 |
SuperBlock |
Jeden čištěný glykoprotein bez séra a biotinů |
|
|
PBS TBS PBST TBST |
SEA BLOCK Blokovací vyrovnávací paměť |
Lososové sérum Steelhead |
|
|
PBS |
Blokovač BSA |
Vyčištěný hovězí sérový albumin |
|
|
PBS TBS |
Blokovací kasein |
Čištěný kasein |
|
|
PBS TBS |
Blocker BLOTTO |
Beztučné sušené mléko |
|
|
TBS |
Bez bílkovin |
Sloučenina neblokující bílkoviny |
|
|
PBS TBS PBST TBST |
Rychle blokující vyrovnávací paměť Pierce |
Jediný purifikovaný protein |
|
|
TBS |
SuperSignal Western Blot Enhancer |
Ošetření membránami pro nízké množství nebo špatnou imunoreaktivitu protilátek |
|
|
Připraven k použití |

antibody stripping buffer
Odizolování a opětovné testování Western blotů nabízí několik výhod:
- Konzervování vzorků, které jsou drahé nebo dostupné pouze v omezeném množství;
- Analýza daného blotu pomocí několika různých protilátek, např. Protilátek specifických pro subtyp nebo izoformu;
- Re-analýza anomálních výsledků a potvrzení stejnou nebo jinou protilátkou;
- Oprava chyb v inkubaci se špatnou protilátkou;
- Úspora nákladů na činidla a čas opětovným použitím stejného blotu.
Bylo publikováno několik protokolů pro odstraňování protilátek z Western blotů, včetně protokolů, které využívají nízké pH, teplo a detergent a chaotropní činidla. Níže jsou uvedeny tři doporučené protokoly. První je použitelný pro jakýkoli chemiluminiscenční substrátový systém a k uvolnění protilátek používá kombinaci detergentu a tepla. Druhý se běžně používá pro aplikace, kde musí být protilátky odděleny od antigenu a používají nízké pH ke změně struktury protilátky takovým způsobem, že vazebné místo již není aktivní.
Třetí protokol využívá soupravu ReBlot ™ Plus Western Blot Recycling Kit, která byla specificky formulována pro odstraňování protilátek z membrán Western blot. Mezi výhody tohoto přístupu patří
- Zamezení zápachu souvisejícího s β-merkaptoethanolem.
- Zpracování při pokojové teplotě.
- Odstranění protilátek za 15 minut.
Žádná z těchto metod neodstraní barevné sraženiny generované z chromogenních detekčních systémů (např. BCIP, 4CN, DAB a TMB). Stále je však možné analyzovat blot pomocí jiné protilátky specifické pro jiný cílový protein.
Obvykle by tyto protokoly měly být používány pouze pro kvalitativní účely, pokud nebylo stanoveno, že stripování kvantitativně neovlivňuje daný antigen. V závislosti na použitém způsobu a typu membrány mnoho antigenů vydrží alespoň 5 stripovacích cyklů. Je však třeba vzít v úvahu, že během každého stripovacího cyklu budou odstraněny malé části proteinů imobilizovaných membránou. Pokud má být detekováno několik antigenů postupně, doporučuje se začít s antigeny, u nichž se očekává výskyt s nižším výskytem nebo s nižším signálem.
Zde je několik dalších doporučení při plánování experimentu Western blot s jedním nebo více koly odstraňování protilátek.
- Membrány PVDF jsou odolnější než nitrocelulóza, a proto se doporučují pro jakýkoli protokol zahrnující odizolování protilátek.
- Sušení PVDF membrán bezprostředně po přenosu z gelu SDS-PAGE zlepšuje vazbu proteinů na membránu a je zvláště doporučeno, pokud je plánováno vícenásobné stripování. Před prvním kolem imunodetekce musí být suché PVDF membrány znovu navlhčeny alkoholem.
- Nejprve detekujte antigeny s nízkou četností.
- Před protilátkami s vysokou afinitou použijte protilátky s nízkou afinitou.
- Důležité: Přestože se doporučuje sušení PVDF blotu bezprostředně po přenosu, blot by se neměl nechat zaschnout mezi koly imunodetekce. Jakékoli zbytkové molekuly protilátky se trvale navážou na membránu, pokud se nechá uschnout.
West Ez Stripping Buffer, Economic Size |
|||
S2100-050 | GenDepot | 500ml | EUR 212 |
West Ez Stripping Buffer, Economic Size |
|||
S2100-100 | GenDepot | 2x500ml | EUR 280 |
Western blot recycling stripping buffer, 50 ml (10X) |
|||
90101 | Alpha Diagnostics | 50 ml | EUR 238 |
Phospho Antibody Stripping Solution |
|||
AKR-102 | Cell Biolabs | 1 kit | EUR 392 |
Description: This reagent allows you to strip phospho antibodies from protein blots and subsequently re-probe the same blot. |
101Bio WB Stripping Solution |
|||
P5W3 | 101Bio | - | Ask for price |
T-Pro Western Blot Stripping Reagent |
|||
JB11-K002 | T-Pro Biotechnology | 500ml/BT | EUR 178 |
Antibody diluent buffer |
|||
AR1106-2 | BosterBio | 12ml | EUR 91 |
10xTaq Buffer |
|||
PCRB60 | Bio Basic | 4x1.5ml, 6ml | EUR 58.7 |
ADA buffer |
|||
AD0003 | Bio Basic | 25g | EUR 64.79 |
Tricine buffer |
|||
20-abx082551 | Abbexa |
|
|
Wash Buffer |
|||
abx098952-20ml | Abbexa | 20 ml | EUR 91 |
Coating Buffer |
|||
abx098970-1vial | Abbexa | 1 vial | EUR 154 |
Blocking Buffer |
|||
abx098972-1vial | Abbexa | 1 vial | EUR 154 |
Lysis Buffer |
|||
abx098984-LysisBuffer120ml | Abbexa | Lysis Buffer 1 (20 ml) | EUR 154 |
Lysis Buffer |
|||
abx098984-LysisBuffer3100ml | Abbexa | Lysis Buffer 3 (100ml) | EUR 230 |
Lysis Buffer |
|||
abx098984-LysisBuffer420ml | Abbexa | Lysis Buffer 4 (20 ml) | EUR 154 |
Binding Buffer |
|||
abx290019-50ml | Abbexa | 50 ml | EUR 230 |
Wash Buffer |
|||
abx293002-30ml | Abbexa | 30 ml | EUR 105 |
PBS Buffer |
|||
RM00012 | Abclonal | 2L | EUR 102 |
Fixation Buffer |
|||
22015 | Biotium | 100mL | EUR 149 |
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 100mL |