Název: Stripping Solution pro protilátky
Katalogové číslo: L7710A, 500ml * GV0480, 500ml 5X
* Dostatek reagencií pro membránové proužky 3000 cm2 nebo 200-400 nebo 20-40 standardních blotů
• Skladování: Skladujte při pokojové teplotě (pro dlouhé skladování: +4 ° C) (L)
● Merkaptoethanol bez štiplavého zápachu Šetří čas
● Odizolování protilátek se provádí při pokojové teplotě. Není nutné zahřívání blotů Šetří nákladný vzorek
● Odizolujte protilátky za pouhých 15 minut při pokojové teplotě Ekonomické
● Ve většině případů se lze vyhnout opětovnému blokování blotů

Vyrovnávací vyrovnávací paměť Western Blot

 

Blokovací vyrovnávací paměť	Blokovací činidlo	Přednosti	Kdy použít	Dostupné formáty
StartingBlock	Jediný purifikovaný protein bez séra a biotinu	Funguje dobře se širokou škálou protilátek a kombinací protilátek. Kompatibilní se streptavidinovými systémy Blokuje za méně než 15 minut	Nejlepší pro středně vysoké proteiny nebo silnou afinitu k protilátkám Vysoké pozadí s aktuální blokovací vyrovnávací pamětí Odstraňování a zkoušení westernových blotů	PBS TBS PBST TBST
Blocker FL	Jediný purifikovaný protein	Blokuje přebytečná nespecifická vazebná místa, aby pomohla snížit fluorescenci pozadí, Funguje jak s nitrocelulózou, tak s nízko fluorescenčním PVDF Bez pracích prostředků Blokuje za 15-30 minut	Fluorescenční westernový přenos Zobrazování a skladování suchých fluorescenčních blotů	10x
Pierce Clear Milk Blocking Buffer	Vyčeřené a stabilizované mléčné bílkoviny	Vysoce výkonná náhrada za domácí pufry blokující mléko v aplikacích Western blot Dlouhá trvanlivost při pokojové teplotě	Použijte, když je u netučného mléka vidět vysoké pozadí Zářivkové a chemiluminiscenční aplikace	Borát, pH 7,6
SuperBlock	Jeden čištěný glykoprotein bez séra a biotinů	Formulace na bázi bílkovin neobsahuje žádné imunoglobuliny, albumin ani endogenní biotin, takže je kompatibilní v mnoha situacích, kde selhávají tradiční blokátory. Bez biotinu pro použití se streptavidinovým systémem Blokuje za méně než 10 minut	Vysoké pozadí s aktuální blokovací vyrovnávací pamětí	PBS TBS PBST TBST
SEA BLOCK Blokovací vyrovnávací paměť	Lososové sérum Steelhead	Užitečné v detekčních metodách zahrnujících vzorky savců. Obzvláště účinný v aplikacích zahrnujících fluorescenční zobrazování	Savčí vzorky Fluorescenční westernový přenos	PBS
Blokovač BSA	Vyčištěný hovězí sérový albumin	10% roztoky vysoce kvalitního hovězího sérového albuminu Jediný purifikovaný protein poskytuje méně šancí na zkříženou reakci se složkami testu než roztoky séra nebo mléka	Použijte při cílení na fosfo-proteiny Nejlepší je použít při skladování znovu použitých protilátek v blokátoru	PBS TBS
Blokovací kasein	Čištěný kasein	Pufr blokující jeden protein poskytuje menší šance na zkříženou reakci se složkami testu než roztoky séra nebo mléka	Použijte při vysokém pozadí s beztučnými blokátory mléka	PBS TBS
Blocker BLOTTO	Beztučné sušené mléko	Připravený k použití 5% roztok odtučněného sušeného mléka	Pohodlí-připraveno k použití Konzistentnější produkt než domácí blokátory	TBS
Bez bílkovin	Sloučenina neblokující bílkoviny	Minimalizuje nebo eliminuje zkříženou reaktivitu spojenou s blokovacími pufry na bázi proteinů. Kombinace vzorků a protilátek vyžadují eliminaci všech možných exogenních živočišných proteinů v testovacím systému, aby se zabránilo zkřížené reakci nebo zhasnutí požadované funkce sondy	Použijte, když blokátory na bázi proteinů způsobují vysoké pozadí	PBS TBS PBST TBST
Rychle blokující vyrovnávací paměť Pierce	Jediný purifikovaný protein	Blokuje za 5 minut	Když je čas nezbytný	TBS
SuperSignal Western Blot Enhancer	Ošetření membránami pro nízké množství nebo špatnou imunoreaktivitu protilátek	Předběžná úprava nitrocelulózových membrán Snižuje množství primární protilátky potřebné pro sondování	Použijte, když je primární protilátka 3 až 100krát menší než primární protilátka, než se obvykle používá k detekci požadovaného proteinu	Připraven k použití

 

Odizolování a opětovné testování Western blotů nabízí několik výhod:

1. Konzervování vzorků, které jsou drahé nebo dostupné pouze v omezeném množství;
2. Analýza daného blotu pomocí několika různých protilátek, např. Protilátek specifických pro subtyp nebo izoformu;
3. Re-analýza anomálních výsledků a potvrzení stejnou nebo jinou protilátkou;
4. Oprava chyb v inkubaci se špatnou protilátkou;
5. Úspora nákladů na činidla a čas opětovným použitím stejného blotu.

Bylo publikováno několik protokolů pro odstraňování protilátek z Western blotů, včetně protokolů, které využívají nízké pH, teplo a detergent a chaotropní činidla. Níže jsou uvedeny tři doporučené protokoly. První je použitelný pro jakýkoli chemiluminiscenční substrátový systém a k uvolnění protilátek používá kombinaci detergentu a tepla. Druhý se běžně používá pro aplikace, kde musí být protilátky odděleny od antigenu a používají nízké pH ke změně struktury protilátky takovým způsobem, že vazebné místo již není aktivní.

Třetí protokol využívá soupravu ReBlot ™ Plus Western Blot Recycling Kit, která byla specificky formulována pro odstraňování protilátek z membrán Western blot. Mezi výhody tohoto přístupu patří

• Zamezení zápachu souvisejícího s β-merkaptoethanolem.
• Zpracování při pokojové teplotě.
• Odstranění protilátek za 15 minut.

Žádná z těchto metod neodstraní barevné sraženiny generované z chromogenních detekčních systémů (např. BCIP, 4CN, DAB a TMB). Stále je však možné analyzovat blot pomocí jiné protilátky specifické pro jiný cílový protein.

Obvykle by tyto protokoly měly být používány pouze pro kvalitativní účely, pokud nebylo stanoveno, že stripování kvantitativně neovlivňuje daný antigen. V závislosti na použitém způsobu a typu membrány mnoho antigenů vydrží alespoň 5 stripovacích cyklů. Je však třeba vzít v úvahu, že během každého stripovacího cyklu budou odstraněny malé části proteinů imobilizovaných membránou. Pokud má být detekováno několik antigenů postupně, doporučuje se začít s antigeny, u nichž se očekává výskyt s nižším výskytem nebo s nižším signálem.

Zde je několik dalších doporučení při plánování experimentu Western blot s jedním nebo více koly odstraňování protilátek.

• Membrány PVDF jsou odolnější než nitrocelulóza, a proto se doporučují pro jakýkoli protokol zahrnující odizolování protilátek.
• Sušení PVDF membrán bezprostředně po přenosu z gelu SDS-PAGE zlepšuje vazbu proteinů na membránu a je zvláště doporučeno, pokud je plánováno vícenásobné stripování. Před prvním kolem imunodetekce musí být suché PVDF membrány znovu navlhčeny alkoholem.
• Nejprve detekujte antigeny s nízkou četností.
• Před protilátkami s vysokou afinitou použijte protilátky s nízkou afinitou.
• Důležité:  Přestože se doporučuje sušení PVDF blotu bezprostředně po přenosu, blot by se neměl nechat zaschnout mezi koly imunodetekce. Jakékoli zbytkové molekuly protilátky se trvale navážou na membránu, pokud se nechá uschnout.

 

 

West Ez Stripping Buffer, Economic Size
S2100-050	GenDepot	500ml	EUR 212

West Ez Stripping Buffer, Economic Size
S2100-100	GenDepot	2x500ml	EUR 280

Western blot recycling stripping buffer, 50 ml (10X)
90101	Alpha Diagnostics	50 ml	EUR 238

Phospho Antibody Stripping Solution
AKR-102	Cell Biolabs	1 kit	EUR 392
Description: This reagent allows you to strip phospho antibodies from protein blots and subsequently re-probe the same blot.

101Bio WB Stripping Solution
P5W3	101Bio	-	Ask for price

T-Pro Western Blot Stripping Reagent
JB11-K002	T-Pro Biotechnology	500ml/BT	EUR 178

Antibody diluent buffer
AR1106-2	BosterBio	12ml	EUR 91

10xTaq Buffer
PCRB60	Bio Basic	4x1.5ml, 6ml	EUR 58.7

ADA buffer
AD0003	Bio Basic	25g	EUR 64.79

Tricine buffer
20-abx082551	Abbexa	EUR 217.00 EUR 189.00	100 g 25 g

Wash Buffer
abx098952-20ml	Abbexa	20 ml	EUR 91

Coating Buffer
abx098970-1vial	Abbexa	1 vial	EUR 154

Blocking Buffer
abx098972-1vial	Abbexa	1 vial	EUR 154

Lysis Buffer
abx098984-LysisBuffer120ml	Abbexa	Lysis Buffer 1 (20 ml)	EUR 154

Lysis Buffer
abx098984-LysisBuffer3100ml	Abbexa	Lysis Buffer 3 (100ml)	EUR 230

Lysis Buffer
abx098984-LysisBuffer420ml	Abbexa	Lysis Buffer 4 (20 ml)	EUR 154

Binding Buffer
abx290019-50ml	Abbexa	50 ml	EUR 230

Wash Buffer
abx293002-30ml	Abbexa	30 ml	EUR 105

PBS Buffer
RM00012	Abclonal	2L	EUR 102

Fixation Buffer
22015	Biotium	100mL	EUR 149
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 100mL