Souprava pro stanovení lipidové peroxidace (MDA)

Souprava pro stanovení lipidové peroxidace (MDA + HNE)

Peroxidace lipidů je dobře známým příkladem oxidačního poškození buněčných membrán, lipoproteinů a dalších struktur obsahujících lipidy. Peroxidační modifikace nenasycených fosfolipidů, glykolipidů a cholesterolu může nastat v různých reakcích. Mohou být vyvolány i) druhy volných radikálů, jako jsou oxylové radikály, peroxylové radikály a hydroxylové radikály odvozené od redukce peroxidu vodíku zprostředkované železem, nebo ii) neradikálové druhy, jako je singletový kyslík, ozon a peroxynitrit generované reakcí superoxidu s oxidem dusnatým.

Malondialdehyd (MDA) a 4-hydroxyalkenaly jsou důležité toxické vedlejší produkty peroxidace lipidů. Měření množství takových aldehydů tedy odpovídá indexu peroxidace lipidů  in vitro  a  in vivo . 4-Hydroxynonenal (4-HNE) je hlavním produktem peroxidačního rozkladu ω-6 polynenasycených mastných kyselin (PUFA). Má cytotoxické, hepatotoxické, mutagenní a genotoxické vlastnosti. Kromě toho byly v podmínkách oxidačního stresu nalezeny zvýšené hladiny HNE v plazmě a různých orgánech. Ve skutečnosti je MDA v mnoha případech nejhojnějším individuálním aldehydem, který je výsledkem peroxidace lipidů. In vitro  MDA může měnit proteiny, DNA, RNA a mnoho dalších biomolekul.

Souprava LPO společnosti Bioquochem   měří koncentrace MDA a HNE jako index lipidové peroxidace. Za prvé, kyselinou katalyzovaný útok v poloze 3 indolového kruhu iniciuje reakce mezi indoly a aldehydy (MDA a HNE). Výsledkem této reakce je diindolylalkan (chromofor) s maximální absorbancí v oblasti 580-620 nm.

V našem testu indol (Reagent A) reaguje rychle s MDA a HNE v kyselém prostředí, čímž se získá chromofor (C) s vysokým molárním koeficientem extinkce při jeho maximální absorpční vlnové délce 586 nm.

 

• Přehled produktů

  Souprava pro stanovení lipidové peroxidace (MDA) (kolorimetrická/fluorometrická) (ab118970) poskytuje praktický nástroj pro citlivou detekci malondialdehydu (MDA).

  V protokolu testu lipidové peroxidace reaguje MDA ve vzorku s kyselinou thiobarbiturovou (TBA) za vzniku aduktu MDA-TBA. Adukt MDA-TBA lze snadno kvantifikovat kolorimetricky (OD = 532 nm) nebo fluorometricky (Ex/Em = 532/553 nm). Tento test detekuje hladiny MDA již od 1 nmol/jamku kolorimetricky a 0,1 nmol/jamku fluorometricky.

  Test MDA je také označován jako test TBARS.

  

  Souhrn protokolu testu peroxidace lipidů:
  -přidejte roztok TBA ke vzorkům a standardům, inkubujte 60 minut při 95 ° C, chladte 10 minut v ledové lázni
  -přeneste do jamek mikrodestičky
  -analyzujte čtečkou mikrodestiček
  Pro vyšší citlivost vysrážejte n-butanolem, centrifugujte, usušte a resuspendujte pelety před analýzou.

  K dispozici je čínský protokol.  Viz část protokoly níže.

  Pro alternativní test MDA bez kroků zahřívání požadovaných v testu TBARS zkuste test MDA ab233471.

• Poznámky

  Peroxidace lipidů se týká oxidační degradace lipidů. V tomto procesu odebírají volné radikály elektrony z lipidů (obecně v buněčných membránách), což vede k poškození buněk. Kvantifikace peroxidace lipidů je nezbytná pro posouzení oxidačního stresu. Lipidová peroxidace tvoří reaktivní aldehydy, jako je malondialdehyd (MDA) a 4-hydroxynonenal (4- HNE), jako přírodní bi-produkty. Malondialdehyd (MDA) a 4-hydroxynonenal (4-HNE) se často používají jako markery peroxidace lipidů a k testování na oxidační poškození / oxidační stres.

  Související produkty

  Prostudujte si marker oxidačního stresu a průvodce testem, nebo průvodce celým testem metabolismu, abyste se dozvěděli více o testech na metabolity, metabolické enzymy, mitochondriální funkce a oxidační stres a také o tom, jak testovat metabolické funkce v živých buňkách pomocí čtečky destiček.

  Podívejte se také na populární testovací sadu 4-HNE ab238538 jako alternativní marker peroxidace lipidů a oxidačního stresu.

  
  Jak ostatní vědci použili soupravu Lipid Peroxidation Assay Kit ab118970

  Testovací souprava MDA/TBARs byla použita v publikacích u různých typů vzorků, včetně:
  – Lidské: sérum ¹ , hippocampální primární buněčné extrakty ² , A375 kultivované buněčné lyzáty ³ , vzorky plazmy a destiček ⁴
  – Myš: neuronální buněčné lyzáty ⁵ , extrakt srdeční tkáně ⁶ , plazma ⁷ , buněčné extrakty ⁸
  – Krysa: extrakty hippocampální tkáně ⁹ , kardiomyocytové extrakty kultivovaných buněk ¹⁰ , plicní lyzáty ¹¹
  – Prase: sérum ¹²

  ^{Reference: 1 – Shen J et al. 2018, 2 – Wang Q a kol. 2019, 3 – Luo M a kol. 2018, 4 – Mustafa AG a kol. 2018, 5 – Murphy K et al. 2018, 6 – Guan F et al. 2019, 7 – Costa CRC a kol. 2018, 8 – Eleftheriadis T et al. 2019, 9 – Malekiyan et al. 2019, 10 – Zhou Z et al. 2018, 11 – Li L a kol. 2018, 12 – Lee SE a Kang KS 2019}

• Plošina

  Čtečka mikrodestiček

 

 

Lipid Peroxidation Colorimetric Assay Kit
K454-100	Biovision		EUR 544

Lipid Peroxidation (MDA) Colorimetric/Fluorometric Assay Kit
K2167-100	ApexBio	100 assays	EUR 586

Lipid Peroxidation (MDA) Colorimetric/Fluorometric Assay Kit
K739-100	Biovision		EUR 582

Cell Meter™ Fluorimetric Cellular Lipid Peroxidation Assay Kit
22906	AAT Bioquest	200 Tests	EUR 306

Cell Meter™ Intracellular Colorimetric Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit
15991	AAT Bioquest	200 tests	EUR 393

Myeloperoxidase (MPO) Peroxidation Activity Assay Kit
K747-100	Biovision		EUR 327

OxiSelect Myeloperoxidase Peroxidation Activity Assay Kit (Fluorometric)
STA-805	Cell Biolabs	192 assays	EUR 577
Description: Myeloperoxidase (MPO) is a heme-based peroxidase enzyme responsible for antimicrobial activity against a wide range of organisms. It has also been found to be correlated with increased oxidative stress and decreased levels of catalase activity. The OxiSelect Myeloperoxidase Chlorination Activity Assay Kit is a quantitative, fluorometric assay for measuring the myeloperoxidase peroxidation activity within a sample.

Lipid A Lipopolysaccharide (LPS Lipid A / Endotoxin) Antibody
abx415762-1ml	Abbexa	1 ml	EUR 606

Lipid A Antibody
abx023083-1ml	Abbexa	1 ml	EUR 739

Lipid Extraction & Polar/Neutral Lipid Separation Combo Kit (Chloroform Free)
MET-5009-C	Cell Biolabs	50 preps	EUR 659
Description: This kit combines a chloroform free organic lipid extraction with further separation of polar and neutral lipids. The lipid extraction first extracts lipids from a crude lipid source to a chloroform free upper organic phase using a proprietary alcohol. After addition of a proprietary organic compound, the mixture is centrifuged to separate the phases. The recovered organic phase containing lipids is dried and then polar and neutral lipids are separated by adding a proprietary secondary alcohol and organic compound. The layers are separated, dried, and resuspended for further analysis.

Lipid Droplet Isolation Kit
MET-5011	Cell Biolabs	50 preps	EUR 415
Description: Lipid droplets are lipid rich organelles found in the adipose tissue of eukaryotes. They function to regulate the hydrolysis and storage of neutral lipids and serve as storage for cholesterol and acyl-glycerols. Lipid droplets have also been associated with inflammatory responses, obesity, atherosclerosis, and cancer.

Lipid Quantitation Kit (Colorimetric)
STA-613	Cell Biolabs	100 assays	EUR 531
Description: Cell Biolabs? Lipid Quantification Kit measures the lipid content (unsaturated fatty acids only) of samples using the sulfo-phospho-vanillin method, resulting in a simple colorimetric readout amenable to multi-well plate detection.

Lipid Quantification Kit (Fluorometric)
STA-617	Cell Biolabs	100 assays	EUR 531
Description: The Lipid Quantification Kit (Fluorometric) uses a fluorometric detection system to quantify neutral lipids in a convenient 96-well microplate reader. The kit includes sufficient reagents for 100 assays.

Monophosphoryl Lipid A (Synthetic)
VAdv-Ly0012-1mg	Creative Biolabs	1 mg	EUR 861
Description: Synthetic Monophosphoryl Lipid A, pure compound, a TLR4-based vaccine adjuvant.

Monophosphoryl Lipid A (Synthetic)
VAdv-Ly0012-5mg	Creative Biolabs	5 mg	EUR 2511
Description: Synthetic Monophosphoryl Lipid A, pure compound, a TLR4-based vaccine adjuvant.

Synthetic Monophosphoryl Lipid A
VAdv-Ly0031	Creative Biolabs	1 mg	EUR 2131
Description: Synthetic monophosphoryl lipid A, a TLR4 agonist vaccine adjuvant.

Ceraplex Lipid Concentrate(1000X)
C3316-010	GenDepot	100ml	EUR 120

Ceraplex Lipid Concentrate(1000X)
C3316-050	GenDepot	500ml	EUR 246

Anti-Lipid A antibody
STJ16100142	St John's Laboratory	1 mL	EUR 289

Serum Albumin, Lipid Free Protein
20-abx260049	Abbexa	EUR 773.00 EUR 286.00 EUR 523.00	100 mg 10 mg 50 mg

Lipid Extraction Kit (Chloroform-Free)
STA-612	Cell Biolabs	50 preps	EUR 496
Description: Cell Biolabs? Lipid Extraction Kit isolates total lipids by organic extraction, but circumvents disadvantages of traditional chloroform extraction methods by extracting lipids to an upper organic phase (making it amenable to high throughput extraction) that is chloroform free.